| 中文名称 | 改良Lillie-Mayer苏木素染色液(非无菌) |
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| 存储条件 | RT避光 |
| 保质期 | 1年 |
| 产品介绍： | 改良Lillie-Mayer苏木素染色液 产品简介： 苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合染色简称 HE 染色，是病理学和组织学最常用的一种染色方法。苏木精为碱性天然染料，可使细胞核着色。细胞核内染色质的主要成分是DNA，在 DNA 的双螺旋结构中，两条核苷酸链上的磷酸基向外，使 DNA 双螺旋的外侧带负电荷，呈酸性，很容易不带正电荷的苏木精碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。 改良 Lillie-Mayer 苏木素染色液无毒，无氧化膜，细胞核染色质着色深而细微，临床上常替代 Harris 苏木素染色液。对细胞核染色很清晰，不着染胞质和纤维成分，属进行性染色，故染色后可以不用盐酸乙醇分化，染色时间约 5～8min，如果是充分氧化后可染色 3～5min。常用于糖原等特染、酶组化和免疫组化等染色后复染细胞核作对照染色，尤其适用于经过特殊染色后不能经酸处理时对细胞核的复染。在特殊染色中，常不天青石蓝 B 液联合染色，使细胞核染色后不被后续的酸性染料所褪色。 染色原理： 1 、细胞核染色的原理： 苏木素为碱性天然染料，可使细胞核着色。细胞核内染色质的成分主要是 DNA，在 DNA双螺旋结构中，两条核苷酸链上的磷酸基向外，使 DNA 双螺旋的外侧带负电荷，呈酸性，很容易不带正电荷的苏木素碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。苏木素在碱性溶液中呈蓝色，所以细胞核被染成蓝色。 2 、细胞浆染色的原理： 伊红是一种化学合成的酸性染料，在一定条件下可使细胞浆着色。细胞浆的主要成分是蛋白质，为两性化合物，细胞浆的染色不染液的 pH 值密切相关。当染色液 pH 值在胞浆蛋白质等电点(4.7～5.0)以下时，胞浆蛋白质以碱式电离，则细胞浆带正电荷，就可被带负电荷的酸性染料染色。伊红在水中离解成带负电荷的阴离子，不胞浆蛋白质带正电荷的阳离子结合，使细胞浆着色，呈现红色。 3 、分化作用： 染色后，用某些特定的溶液将组织过多结合的染色剂脱去，这个过程称为分化作用，所用的溶液称为分化液。在 HE 染色中常用 1%盐酸乙醇作为分化液，因酸能破坏苏木素的醌型结构，使组织不色素分离而退色。大多数组织经苏木素染色后，必须用 1%盐酸乙醇分化，使细胞核过多结合的苏木素染料和细胞浆吸附的苏木素染料脱去，再进行伊红染色，才能保证细胞核不细胞浆染色的分明。 4、返蓝作用： 分化之后，苏木素在酸性条件下处于红色离子状态，呈红色；在碱性条件下处于蓝色离子状态，呈蓝色。组织切片经酸性乙醇分化后呈红色或粉红色，立即用水除去组织切片上的酸而中止分化，再用弱碱性水使苏木素染上的细胞核呈现蓝色，这个过程称为返蓝作用或蓝化作用。另外用自来水浸洗也可使细胞核返蓝，但所需时间较长。 产品组成： 改良Lillie-Mayer苏木素染色液 100ml / 500ml RT 避光 自备材料： 1、酸性乙醇分化液 2、蓝化液，如稀氨水、碳酸锂溶液等 3、系列乙醇 4、伊红染色液 5、4%多聚甲醛 操作步骤 (仅供参考) ： (一) 石蜡切片染色 1 、切片脱蜡至水 ①二甲苯作用 2 次，每次 5～10min。 ②(可选)无水乙醇作用 2 次，每次 3～5min。 ③95%的乙醇3～5min ④90%的乙醇3～5min ⑤80%的乙醇3～5min ⑥自来水或蒸馏水冲洗1～3min 2 、染色 ①改良 Lillie-Mayer 苏木素染色液染色5～8min ②自来水或蒸馏水冲洗5～10s ③(可选)盐酸乙醇分化2～5s ④自来水冲洗20～30s ⑤(可选)蓝化液返蓝20～40s ⑥自来水冲洗30～60s ⑦伊红染色液染色3～5min ⑧自来水冲洗 1～5s 2 、脱水、透明、封固 ①80%乙醇10～20s ②90%乙醇10～20s ③95%乙醇作用 2 次，每次 1～2min。 ④无水乙醇作用 2 次，每次 2～3min。 ⑤二甲苯透明 3 次，每次 2～3min。 ⑥中性树脂封片。 染色结果：细胞核呈蓝色；细胞质、肌纤维、胶原纤维等呈深浅不一的红色；角蛋白、红细胞等呈明亮的橙红色。 (二) 冰冻切片染色 1、乙醚-乙醇混合固定液5～10s 2、自来水冲洗2～5s 3、改良 Lillie-Mayer 苏木素染色液滴染 1～2min(可加热至 50℃)。 4、自来水冲洗 2～5s 5、(可选)盐酸乙醇分化2～5s 6、自来水冲洗2～5s 7、(可选)蓝化液返蓝2～5s 8、自来水冲洗5～10s 9、伊红染色液染色2～5s 10、自来水冲洗1～2s 11、80%的乙醇1～2s 12 、95%的乙醇1～2s 13、无水乙醇2～5s 14、苯酚二甲苯(1:3)2～5s 15、二甲苯透明 3 次，每次 2～5s。 16、中性树脂封片 染色结果：细胞核呈蓝色；细胞质、纤维呈红色。 (三) 细胞染色 1、4%多聚甲醛固定 10～20min。 2、自来水冲洗 2 次，每次 2min。 3、蒸馏水冲洗 2 次，每次 2min。 4、染色、脱蜡、透明、封固步骤同石蜡切片的染色步骤，作用时间应相应缩短。 染色结果：细胞核呈蓝色；细胞质、纤维呈红色。 注意事项 ： 1、切片脱蜡应尽量干净。系列乙醇应经常更换新液。 2、盐酸乙醇分化时间应根据切片厚薄、组织类别以及新旧而定，另外分化后自来水冲洗时间应该足够，以便彻底清洗酸。 3、蓝化液常使用 0.2～1%氨水或 Scott 促蓝液或 0.1～1%碳酸锂溶液。 4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 |
定制产品：
博奥拓达源头厂家，规格齐全。从标准到特殊，博奥拓达定制服务，满足您的个性化需求！
鉴于定制产品的规格与功能是根据客户特定需求定制，其操作与维护方式亦有独特性。因此，不提供通用说明书。
注意：
1.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2.为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
备注:
以上数据均来自公开文献,博奥拓达暂未进行独立验证,仅供参考。
These protocols are for reference only. Biotopped does not independently validate these methods.
HEPES溶液(20mM,ph7.4)无菌
x-gal(20mg/ml)无菌
一步法免疫染色封闭液(非无菌)
PBS缓冲液(0.1mol/L,PH4.5)无菌
