Schiff试剂

产品简介：
       Schiff 试剂又称雪夫试剂、希夫试剂等，是 Schiff 于 1866 年发现的一种有效的醛试剂，用于检测醛基(-CHO)。Schiff 试剂主要成分是副品红碱，为三氨基三苯甲烷的氯化物，其中的醌基是品红显色原因。在酸化的品红液中加入亚硫酸或者亚硫酸盐，品红被还原为品红-亚硫酸(或称白亚磺酸)，即 Schiff 试剂。
       Schiff 试剂主要用于糖原、黏液物质等染色，常不过碘酸(也称高碘酸)配合使用，过碘酸是一种强氧化剂，它能氧化糖类及有关物质中的 1，2-乙二醇基，使之变为二醛，醛不 Schiff 试剂能结合成一种品红化合物，产生紫红色。配制好的 Schiff 试剂接近于无色。


自备材料：
1、10%福尔马林固定液
2、蒸馏水
3、过碘酸溶液
4、苏木素染色液，
5、酸性乙醇分化液
6、系列乙醇

操作步骤 (仅供参考) ：
1、常规固定，常采用 10%的福尔马林，常规脱水包埋。
2、石蜡切片脱蜡入蒸馏水；冰冻切片直接入蒸馏水。
3、自来水冲洗 2～3min，再用蒸馏水浸洗 2 次。
4、切片入过碘酸溶液 ，室温放置 5～8min，一般不宜超过 10min。
5、自来水冲洗 1 次，再用蒸馏水浸洗 2 次。
6、切片入 Schiff Reagent，室温阴暗处浸染 10～20min。
7、自来水冲洗 10min。
8、入苏木素染色液， 染细胞核 1～2min。
9、酸性乙醇分化液分化 2～5s。
10、自来水冲洗 10～15min 后，更换蒸馏水清洗使其返蓝。
11、逐级常规乙醇脱水。二甲苯透明，中性树胶封固。

染色结果： PAS 反应阳性物质(糖原或多糖)呈红色或紫红色

阴性对照 (可选) ：
1、取淀粉酶 1g 溶解于 PBS(pH5.3) 100ml，处理 30～60min，不其他切片共同入过碘酸溶液，结果应为阴性。
2、(备选方案)取唾液片(过滤后用)处理 30～60min，不其他切片共同入过碘酸溶液，结果应为阴性。
3、(备选方案)如果对照片采用其自身样本，对照片不经过碘酸溶液这一步，直接入 Schiff
Reagent。结果应为阴性。

注意事项 ：
1、Schiff Reagent 应置于 4℃密闭保存，使用时避免接触过多阳光和空气。在室温过低 (小于 15℃)情冴下反应缓慢，可以置于适宜温水 (小＜30℃)中恢复后再使用。
2、理想的 Schiff Reagent 接近于无色，如果试剂颜色呈极轻微粉红色亦可考虑使用。如试剂颜色呈明显的红色应弃用。
3、颜色深浅很大程度上取决于样品在过碘酸溶液和 Schiff Reagent 中作用时间的长短。
4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。