| 中文名称 | 碘化丙啶PI染色液(50ug/ml，含破膜剂)非无菌 |
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| 存储条件 | -20℃避光 |
| 保质期 | 6个月 |
| 产品介绍： | 产品简介: 碘化丙啶染色(PI stain)可以对细胞周期与细胞凋亡进行分析。碘化丙啶(Propidiumlodide，PI是一种可以嵌合到双链DNA和RNA的碱基对中并与之结合的荧光染料，无碱基特异性。碘化丙啶与双链DNA结合后可以产生荧光，并且荧光强度和双链DNA的含量成正比。细胞内的DNA被Propidium lodide染色后，可以用流式细胞仪对细胞进行DNA含星测定。 碘化丙啶染色液(50μg/ml)主要由PI､破膜剂等组成，经常用于培养的贴壁或悬浮细胞的细胞周期与细胞凋亡检测，亦可用于区分细胞凋亡和细胞坏死。PI染色液工作浓度为20~ 50μg/ml，不含RNase，推荐用于RNA染色，细胞检测含量范围一般为0.1~1×106之间｡ 操作步骤(仅供参考): 1､细胞样品的制备： (1)贴壁细胞： ①小心收集细胞培养液到一个无菌离心管内备用｡ ②用胰蛋白酶消化细胞至可以被轻轻用移液管或枪头吹打下来时，加入前面收集的细胞培养液，吹打下所有的贴壁细胞，并轻轻吹散细胞｡ ③收集上述细胞悬液到离心管内｡ ④4℃，离心，使细胞沉到管底｡小心吸取上清并丢弃，可留大约50μl培养液，以免吸走细胞｡ ⑤加入约1ml提前预冷的PBS，重悬细胞，并转移至1.5ml无菌离心管｡ ⑥4℃，1000g 离心 3～5min，使细胞沉到管底｡ ⑦小心吸取上清并丢弃，可留大约50μl PBS ，以免吸走细胞｡ ⑧轻轻弹击离心管底以适当分散细胞，避免细胞成团｡ (2)悬浮细胞： ①4℃，1000g 离心 3～5min，使细胞沉到管底｡ ②小心吸取上清并丢弃，可留大约50μl培养液，以免吸走细胞｡ ③加入约1ml提前预冷的PBS，重悬细胞，并转移至1.5ml无菌离心管｡ ④4℃，1000g 离心 3～5min，使细胞沉到管底｡ ⑤小心吸取上清并丢弃，可留大约50μl PBS，以免吸走细胞｡ ⑥轻轻弹击离心管底以适当分散细胞，避免细胞成团｡ 2､细胞的固定： 加入1ml冰浴预冷70%乙醇中，轻轻吹打混匀，4℃条件下固定2h或更长时间｡ 4℃固定12~ 24h可能效果更佳｡ 3､细胞的清洗： ①4℃，1000g 离心 3～5min，使细胞沉到管底｡ ②小心吸取上清并丢弃，可留大约50μl溶液，以免吸走细胞｡ ③加入约1ml提前预冷的PBS，重悬细胞，并转移至1.5ml无菌离心管｡ ④4℃，1000g 离心 3～5min，使细胞沉到管底｡ ⑤小心吸取上清并丢弃，可留大约50μl PBS，以免吸走细胞｡ ⑥轻轻弹击离心管底以适当分散细胞，避免细胞成团｡ 4､PI 染色： 在每个待检细胞样品中加入500μl配制好的PI染色工作液，轻轻重悬细胞沉淀，置于37℃避光水浴30min｡在24h内进行染色或流式细胞仪分析｡ 5､检测与分析： 用流式细胞仪在激发波长488nm波长处检测红色荧光，同时检测光散射情况｡采用适当分析软件进行细胞DNA或RNA含量分析和光散射分析｡ 染色结果: 凋亡细胞G1峰左侧出现亚二倍体细胞群的峰型，在光散射谱上，前向光散射低于正常，侧向光散射高于正常｡ 注意事项:
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定制产品：
博奥拓达源头厂家，规格齐全。从标准到特殊，博奥拓达定制服务，满足您的个性化需求！
鉴于定制产品的规格与功能是根据客户特定需求定制，其操作与维护方式亦有独特性。因此，不提供通用说明书。
注意：
1.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2.为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
备注:
以上数据均来自公开文献,博奥拓达暂未进行独立验证,仅供参考。
These protocols are for reference only. Biotopped does not independently validate these methods.
HEPES溶液(20mM,ph7.4)无菌
x-gal(20mg/ml)无菌
一步法免疫染色封闭液(非无菌)
PBS缓冲液(0.1mol/L,PH4.5)无菌
