| 中文名称 | MTT溶液(5mg/ml)非无菌 |
|---|---|
| 英文名称 | MTT Solution (5 mg/mL), Non-Sterile |
| 存储条件 | -20℃避光 |
| 保质期 | 1年 |
| 产品介绍： | 产品简介： MTT比色法是一种检测细胞存活和生长的方法。MTT检测原理在于活细胞线粒体中的琥珀酸脱 氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色Formazan并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。在特 定溶剂 (如DMSO)存在的情况下，可以被完全溶解。然后通过酶标仪可以测定570nm波长附近的吸 光度。细胞增殖越多越快，则吸光度越高；细胞毒性越大，则吸光度越低。 操作步骤（仅供参考）： 1. 细胞用含血清的培养液培养至对数生长期，常规胰蛋白酶消化液消化细胞（悬浮细胞无需消化）。 2. 低速离心，收集细胞沉淀。 3. 用培养液重悬细胞沉淀，制备成单细胞悬液，并计数。 4. 细胞接种于96孔培养板，一般接种密度为3000-10000/孔。通常细胞增殖实验每孔加3000个细胞， 细胞毒性实验每孔加6000个细胞即可。具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速 度的快慢等决定。 5. 37℃ 5% CO2继续培养或按照实验具体需要进行培养，一般培养6-24h。 6. 按照实验具体要求，给予0-20μL干预药物处理，37℃ 5% CO2继续培养至合适时间。 7. 弃培养液，每孔加入MTT溶液和新鲜培养液，在细胞培养箱内继续孵育。 8. 弃培养液，每孔加入DMSO，置摇床上低速震荡，使结晶物充分溶解。如果紫色结晶较小或较少， 溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大或较多，溶解的时间会长一些。 9. 在酶标仪570nm测定各孔吸光度。若读数超出最大范围，可改用OD490测定各孔吸光值。 注意事项： 1、MTT溶液尽量减少反复冻融的次数，以免失效，当颜色变为灰绿色时，请勿使用。 2、由于使用96孔板进行检测，如果细胞培养时间较长，应注意蒸发问题。 3、MTT溶液在低温情况下会凝固，使用前请置于室温或20-25℃水浴至全部融解后使用。 4、观察Formazan是否完全溶解，亦可借助光学显微镜观察。 5、培养细胞时尽量避免细菌污染。 6、应注意设立OD调零孔和对照。 7、含酚红的培养基和盐溶液会使背景的吸光值增高，同时也会降低灵敏度。 8、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 |
定制产品：
博奥拓达源头厂家，规格齐全。从标准到特殊，博奥拓达定制服务，满足您的个性化需求！
鉴于定制产品的规格与功能是根据客户特定需求定制，其操作与维护方式亦有独特性。因此，不提供通用说明书。
注意：
1.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2.为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
备注:
以上数据均来自公开文献,博奥拓达暂未进行独立验证,仅供参考。
These protocols are for reference only. Biotopped does not independently validate these methods.
HEPES溶液(20mM,ph7.4)无菌
x-gal(20mg/ml)无菌
一步法免疫染色封闭液(非无菌)
PBS缓冲液(0.1mol/L,PH4.5)无菌
